

簡(jiǎn)要描述:Swant特約代理經(jīng)銷商:上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司關(guān)鍵詞:Swant鈣結(jié)合蛋白抗體、Calbindin D-28k抗體、Parvalbumin抗體、Calretinin抗體、Swant AG抗體代理、瑞士進(jìn)口抗體品牌、鈣離子結(jié)合蛋白檢測(cè)抗體、神經(jīng)細(xì)胞標(biāo)記抗體、NeuN替代標(biāo)記抗體、GABA抗體、Glutamate抗體、鈣泵抗體PMCA、Na+-Ca2+交換子抗體、IGF1抗體IGF2抗體
詳細(xì)介紹
| 品牌 | Swant/瑞士 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥,綜合 |
▎關(guān)于Swant
瑞士Swant(Swant AG)是一家長(zhǎng)期聚焦于鈣相關(guān)蛋白抗體與抗原研發(fā)生產(chǎn)的生物企業(yè),總部位于瑞士,核心團(tuán)隊(duì)將數(shù)十年精力投入到一個(gè)看似狹窄、實(shí)則極其關(guān)鍵的生物學(xué)方向上——鈣結(jié)合蛋白及其相互作用分子的免疫學(xué)檢測(cè)工具。
在細(xì)胞生物學(xué)和神經(jīng)科學(xué)中,鈣離子(Ca2?)作為第二信使參與的信號(hào)通路覆蓋了從神經(jīng)沖動(dòng)傳導(dǎo)、肌肉收縮、激素分泌,到細(xì)胞凋亡、基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控等大量生命過(guò)程。而鈣結(jié)合蛋白(Calbindin D-28k、Calretinin、Parvalbumin等)正是這些信號(hào)事件中的傳感器與緩沖器。要在組織切片中看清它們?cè)谀睦铩⒃谑裁醇?xì)胞類型中表達(dá);要在蛋白水平上確認(rèn)它們的豐度變化——就需要特異性強(qiáng)、效價(jià)穩(wěn)定、可重復(fù)性好的免疫學(xué)試劑。
Swant所做的,正是為這一需求持續(xù)提供經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的單克隆與多克隆抗體工具,以及配套的高純度重組抗原蛋白。經(jīng)過(guò)多年的積累,Swant的抗體產(chǎn)品已在大量同行評(píng)議文獻(xiàn)中被采用,尤其在腦組織分型、神經(jīng)元亞群標(biāo)記、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞鑒定、鈣信號(hào)相關(guān)蛋白定位等研究方向形成了相對(duì)穩(wěn)定的使用者群體。
▎核心優(yōu)勢(shì)
① 方向聚焦,產(chǎn)品線圍繞"鈣結(jié)合蛋白"體系搭建
Swant不是大而全的通用抗體工廠,而是圍繞鈣生物學(xué)這條主線,把幾個(gè)關(guān)鍵分子的抗體做出深度:
• 鈣結(jié)合蛋白系列:Calbindin D-28k、Calretinin、Parvalbumin、Calmodulin、Oncomodulin、S-100β、S100A6等;
• 鈣轉(zhuǎn)運(yùn)與泵控系統(tǒng):Na?-Ca2?交換子(NCX)蛋白抗體、質(zhì)膜Ca2?-ATPase(PMCA1~4)抗體;
• 神經(jīng)活性物質(zhì)相關(guān):GABA抗體、Glutamate抗體;
• 內(nèi)分泌/生長(zhǎng)因子軸:IGF-1、IGF-2抗體;
• 腎素-血管緊張素系統(tǒng):Renin、Angiotensinogen抗體;
• 重組抗原蛋白:提供經(jīng)HPLC/FPLC純化級(jí)別的Calbindin D-28k、Calretinin、Parvalbumin、Calmodulin、S-100β等重組蛋白,用于陽(yáng)性對(duì)照、標(biāo)準(zhǔn)品或包被抗原用途。
這種聚焦策略的好處在于:每一款主力抗體都在其目標(biāo)應(yīng)用場(chǎng)景中被反復(fù)打磨過(guò),而不是廣撒網(wǎng)式的"鋪貨型"產(chǎn)品列表。
② 抗體以高濃度培養(yǎng)上清凍干形式供應(yīng),兼顧穩(wěn)定性與用量靈活性
Swant的經(jīng)典抗體多以濃縮培養(yǎng)上清(conc. supernat.)凍干(lyophilized)形式提供,也有部分腹水來(lái)源(ascites)制備的批次。凍干形式在避光、低溫條件下可以較好地維持抗體活性,同時(shí)便于運(yùn)輸和長(zhǎng)期儲(chǔ)備;復(fù)溶后可根據(jù)實(shí)驗(yàn)類型與信號(hào)強(qiáng)弱,摸索合適的稀釋倍數(shù)。
③ 可用于高稀釋倍數(shù)下的免疫組化(IHC),適合連續(xù)切片染色方案
Swant的抗體在ABC法(Avidin-Biotin Complex)等常見IHC體系中,有資料記載可在超過(guò)1:5,000倍甚至更高稀釋度下仍獲得可用的信噪比(具體最佳稀釋比需按各實(shí)驗(yàn)室固定流程重新滴定)。這意味著一支200 μL的抗體管在實(shí)際使用中往往能支撐大量切片,對(duì)于需要跑批量染色、做多組比較的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)而言,有一定實(shí)用價(jià)值。
④ 重組抗原蛋白經(jīng)HPLC/FPLC純化,可作為方法學(xué)驗(yàn)證的補(bǔ)充材料
除了抗體本身,Swant同時(shí)提供對(duì)應(yīng)靶點(diǎn)的重組蛋白,這對(duì)于以下場(chǎng)景尤其有用:
• Western Blot中跑一塊陽(yáng)性對(duì)照泳道,確認(rèn)抗體識(shí)別條帶的預(yù)期分子量;
• IHC/ICC中設(shè)置吸附實(shí)驗(yàn)(pre-absorption)對(duì)照,評(píng)估染色特異性;
• ELISA或體外結(jié)合實(shí)驗(yàn)中的包被抗原/標(biāo)準(zhǔn)曲線原料。
⑤ 跨物種適應(yīng)性的實(shí)際意義——人源組織的適用性
Swant的Calbindin D-28k、Calretinin、Parvalbumin等關(guān)鍵抗體,在多種脊椎動(dòng)物(包括人、大鼠、小鼠等)的樣本中都有文獻(xiàn)使用記錄,特別是對(duì)人腦組織亞區(qū)神經(jīng)元分型的支持,這是很多實(shí)驗(yàn)室選擇它們的原因之一。
▎熱門產(chǎn)品介紹
一、抗Calbindin D-28k 單抗
? 品名
Calbindin D-28k(鈣結(jié)合蛋白D-28k)小鼠單克隆抗體,IgG1亞型
? 產(chǎn)品特點(diǎn)
• 靶標(biāo)分子量約28 kDa的可溶性鈣結(jié)合蛋白,主要在一類特定神經(jīng)元亞群(如小腦浦肯野細(xì)胞、部分大腦皮層中間神經(jīng)元、齒狀回顆粒細(xì)胞、部分感覺神經(jīng)元)以及某些非神經(jīng)組織中表達(dá);
• 以濃縮培養(yǎng)上清凍干粉末或純化腹水來(lái)源提供,適用于多種免疫檢測(cè)平臺(tái);
• 在免疫組化中呈現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)與部分樹突區(qū)域的細(xì)膩染色特征,背景相對(duì)干凈,適合做連續(xù)切片的細(xì)胞類型定位。
? 存儲(chǔ)條件
• 收到凍干粉后建議短期內(nèi)不開啟的情況下,存放于2~8 °C避光干燥環(huán)境;
• 一旦復(fù)溶(通常加入指定體積的超純水或含穩(wěn)定劑的緩沖液,以說(shuō)明書標(biāo)注為準(zhǔn)),應(yīng)分裝為若干小管,存放于-20 °C(非反復(fù)凍融);
• 工作中稀釋液建議現(xiàn)配現(xiàn)用或4 °C短期保存(≤1周),避免污染。
? 工作原理
Calbindin D-28k作為EF-hand結(jié)構(gòu)家族成員,其空間構(gòu)象在不同物種間保守程度較高。該單抗通過(guò)識(shí)別Calbindin D-28k特異的構(gòu)象或線性表位,在組織切片或膜上形成抗原-抗體復(fù)合物;隨后借助二抗(抗小鼠IgG)+ 顯色系統(tǒng)(HRP-DAB化學(xué)顯色或熒光二抗)將結(jié)合信號(hào)轉(zhuǎn)化為可視化的棕褐色沉淀或熒光信號(hào),從而標(biāo)記出哪些細(xì)胞、哪些區(qū)域含有該鈣結(jié)合蛋白。
? 使用方法(以石蠟切片IHC為例的典型流程框架)
1. 切片準(zhǔn)備:組織經(jīng)合適固定劑(常用4%多聚甲醛/PFA)灌注固定或后固定→梯度酒精脫水→二甲苯透明→石蠟包埋→切片貼附于帶電荷或APES處理玻片;
2. 脫蠟復(fù)水:二甲苯×2 → 遞減酒精系列→蒸餾水洗;
3. 抗原修復(fù):根據(jù)經(jīng)驗(yàn)選用檸檬酸鈉緩沖液(pH 6.0)或EDTA緩沖液(pH 9.0)的熱誘導(dǎo)修復(fù)(HIER:pressure cooker或microwave/sub-boiling),這一步對(duì)核內(nèi)/胞質(zhì)鈣結(jié)合蛋白的暴露尤為關(guān)鍵;
4. 內(nèi)源性過(guò)氧化物酶阻斷:3% H?O?(甲醇或PBS配制),室溫10~15 min;
5. 封閉:含5~10%正常血清(與二抗同源)的緩沖液 + 0.1~0.3% Triton X-100(視穿透需求定),30 min~1 h;
6. 一抗孵育:按預(yù)試滴定好的稀釋比(文獻(xiàn)參考范圍常在1:1,000~1:10,000區(qū)間,但必須以自身系統(tǒng)做梯度滴定)用抗體稀釋液(PBS/0.1% BSA/0.3% Triton)稀釋,4 °C過(guò)夜或室溫2 h;
7. 二抗與信號(hào)放大:生物標(biāo)記抗小鼠IgG → ABC復(fù)合物 → DAB顯色(或熒光二抗直標(biāo)方案跳過(guò)DAB步驟);
8. 復(fù)染、封片、鏡檢(水性封片劑用于熒光,DPX/中性樹脂用于DAB)。
二、抗Calretinin 單抗
? 品名
Calretinin 小鼠單克隆抗體
? 產(chǎn)品特點(diǎn)
• Calretinin同樣屬于EF-hand鈣結(jié)合蛋白家族,分子量約29 kDa,在特定皮層/海馬中間神經(jīng)元、視網(wǎng)膜雙極細(xì)胞、內(nèi)耳毛細(xì)胞、部分感覺神經(jīng)節(jié)等位置有特征性分布;
• 該抗體常用于神經(jīng)元亞型分型方案中,與Parvalbumin、Calbindin D-28k搭配組成"三色/三標(biāo)"或連續(xù)切片標(biāo)記組合,幫助區(qū)分抑制性中間神經(jīng)元的譜系歸屬;
• 在人組織樣本中,Calretinin也對(duì)某些間皮細(xì)胞及間皮瘤相關(guān)標(biāo)記有交叉討論價(jià)值(需結(jié)合形態(tài)與多標(biāo)確認(rèn))。
? 存儲(chǔ)條件
同前述凍干抗體的一般原則:2~8 °C干燥避光未復(fù)溶;復(fù)溶后分裝-20 °C保存,避免反復(fù)凍融。
? 工作原理
Calretinin在細(xì)胞內(nèi)以可溶胞質(zhì)蛋白形式存在,因此多數(shù)情況下不需要強(qiáng)變性條件即可被抗體接觸。單抗結(jié)合后通過(guò)二抗/酶標(biāo)系統(tǒng)級(jí)聯(lián)放大,使目標(biāo)神經(jīng)元胞體與突起呈現(xiàn)出與周圍細(xì)胞可區(qū)分的顯色或熒光輪廓。
? 使用方法
流程與上述Calbindin D-28k基本一致。需要注意的是:
• Calretinin對(duì)某些修復(fù)條件較敏感,EDTA pH 9.0的HIER方案(pressure cooking約2~3 min持壓)在很多人的操作中表現(xiàn)穩(wěn)定;
• 若做多標(biāo)免疫熒光,建議將Calretinin與另兩種標(biāo)記錯(cuò)開宿主物種來(lái)源(或采用間接法的TSA多輪放大方案/直接偶聯(lián)一抗方案),減少交叉反應(yīng)干擾。
三、抗Parvalbumin 單抗
? 品名
Parvalbumin(PV)小鼠單克隆抗體
? 產(chǎn)品特點(diǎn)
• 分子量約12 kDa的小分子EF-hand鈣結(jié)合蛋白,在快速放電型(fast-spiking)抑制性GABA能中間神經(jīng)元中表達(dá)豐富(如大腦皮層、海馬CA1的籃狀細(xì)胞能中間神經(jīng)元等),也見于骨骼肌與某些感覺系統(tǒng);
• 因分子量偏小,石蠟切片中若固定過(guò)度或修復(fù)過(guò)度,可能出現(xiàn)表位遮蔽或彌散丟失,因此對(duì)固定時(shí)長(zhǎng)與修復(fù)條件的控制更為敏感;
• 常與Calretinin、Calbindin D-28k以及GABA等組合,用于繪制"抑制性回路圖譜"。
? 存儲(chǔ)條件
凍干粉:2~8 °C,干燥避光;復(fù)溶后分裝 -20 °C,盡量減少凍融循環(huán)。工作中4 °C可短暫放置。
? 工作原理
Parvalbumin的胞內(nèi)定位以細(xì)胞質(zhì)為主,由于是小分子可溶性蛋白,在良好滲透條件下可較好地被抗體浸潤(rùn)。一抗結(jié)合后經(jīng)酶聯(lián)或熒光二抗可視化,即可在切片上讀出PV陽(yáng)性神經(jīng)元密度、分布形態(tài)、突起網(wǎng)絡(luò)等信息。
? 使用方法要點(diǎn)
• 固定建議控制在合理窗口內(nèi)(例如4% PFA灌注固定數(shù)小時(shí)至過(guò)夜,避免過(guò)度交聯(lián));
• 抗原修復(fù)常用檸檬酸鹽pH 6.0(低壓鍋或水煮法),亦可試驗(yàn)EDTA pH 9.0作對(duì)比;
• 一抗稀釋比同樣需要自身系統(tǒng)滴定——PV抗體在優(yōu)化條件下可以用到相當(dāng)高的稀釋倍數(shù),但前提是背景控制到位(封閉血清種類、Triton濃度、內(nèi)源性過(guò)氧化物酶清除質(zhì)量都要匹配)。
四、抗Na?-Ca2?交換子蛋白(NCX/Cardiac NCX)抗體
? 品名
Na?-Ca2? exchanger protein(NCX)小鼠單克隆抗體
? 產(chǎn)品特點(diǎn)
• NCX是位于細(xì)胞膜上的雙向逆向轉(zhuǎn)運(yùn)體,利用鈉離子梯度排出胞內(nèi)多余鈣離子,在心肌細(xì)胞、神經(jīng)元、腎細(xì)胞等興奮細(xì)胞中起關(guān)鍵穩(wěn)態(tài)作用;
• 抗體靶點(diǎn)多設(shè)計(jì)于胞內(nèi)環(huán)域(loop domain)或C端區(qū)域,適合Western Blot(還原條件下)與固定后透化免疫熒光;石蠟IHC的可行性取決于表位是否耐受固定交聯(lián)。
• 產(chǎn)品可作為研究心臟電生理、神經(jīng)元鈣穩(wěn)態(tài)調(diào)控、缺血再灌注損傷模型的材料之一。
? 存儲(chǔ)條件
凍干品:2~8 °C干燥避光;復(fù)溶后分裝 -20 °C保存;工作液4 °C短期。含甘油的防凍版本(如有)可按說(shuō)明書低溫冷凍。
? 工作原理
NCX作為跨膜多次的蛋白,其胞內(nèi)片段在通透化處理后暴露于抗體。一抗識(shí)別特定表位后,通過(guò)二抗-HRP或熒光二抗實(shí)現(xiàn)可視化。在WB中表現(xiàn)為預(yù)期分子量附近的條帶(注意糖基化與剪切變體可導(dǎo)致條帶遷移偏移,需結(jié)合陽(yáng)性對(duì)照判斷)。
? 使用方法
• WB:組織/細(xì)胞RIPA裂解→BCA定量→SDS-PAGE→轉(zhuǎn)PVDF/NC膜→5%脫脂奶或BSA封閉1 h→一抗4 °C過(guò)夜→TBST洗→二抗→ECL顯影;
• IF/IHC:需保證透化(0.1~0.3% Triton X-100)與封閉充分;心肌組織因富含內(nèi)源性生物與過(guò)氧化物酶,建議加做內(nèi)源性生物阻斷(Avidin/Biotin blocking kit)及延長(zhǎng)H?O?處理。
▎Swant的試劑,解決你實(shí)驗(yàn)中的哪些問題
1. 神經(jīng)元亞群分型時(shí)缺乏可靠的細(xì)胞類型標(biāo)記
當(dāng)你的研究對(duì)象是"中間神經(jīng)元有哪些亞型""不同腦區(qū)的抑制性回路如何分布""某種干預(yù)后特定神經(jīng)元譜系是否改變"——你需要一組在本地固定條件下能穩(wěn)定給出干凈信號(hào)的亞型標(biāo)記抗體。Calbindin D-28k / Calretinin / Parvalbumin 這三類經(jīng)典標(biāo)記之所以被長(zhǎng)期沿用,正是因?yàn)樗鼈兊谋磉_(dá)分區(qū)相對(duì)穩(wěn)定、胞質(zhì)染色模式容易辨認(rèn)。
2. 鈣信號(hào)相關(guān)蛋白的定位數(shù)據(jù)與WB定量需要互相印證
用Fura-2/GCaMP等手段拿到鈣動(dòng)態(tài)之后,下一步常常要問"到底是哪類細(xì)胞在驅(qū)動(dòng)這個(gè)信號(hào)"——PMCA與NCX抗體讓你在組織原位看到鈣外排機(jī)器的空間分布,和功能性鈣成像形成互補(bǔ)。
3. 人腦組織或臨床病理標(biāo)本的標(biāo)記需求
人源樣本中很多抗體交叉反應(yīng)性會(huì)下降。Swant的上述幾款鈣結(jié)合蛋白抗體在多篇涉及人腦、人腫瘤(如間皮瘤中Calretinin的討論)的文獻(xiàn)中出現(xiàn),為需要在人源材料中做驗(yàn)證的課題組提供了一條已有先例的路線。
4. 抗體效價(jià)不穩(wěn)定導(dǎo)致染色批次間差異大
Swant以凍干濃縮形式供應(yīng)的設(shè)計(jì)在一定程度上減緩了"液態(tài)抗體在反復(fù)開管中活性漂移"的問題——前提是你做好復(fù)溶后的分裝紀(jì)律。
5. 需要配套重組抗原做嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目贵w驗(yàn)證
如今期刊對(duì)抗體驗(yàn)證的要求趨嚴(yán)(參見RRID與抗體驗(yàn)證工作組的原則),有對(duì)應(yīng)重組抗原可跑陽(yáng)性對(duì)照與吸附實(shí)驗(yàn),等于給你的數(shù)據(jù)多一層可追溯的證據(jù)鏈。
▎購(gòu)買Swant產(chǎn)品——常見疑問與解答
Q1:Swant的抗體都是小鼠單抗嗎?能不能做多色熒光里和我的兔一抗搭配?
A:Swant的主力產(chǎn)品線以小鼠來(lái)源單克隆抗體(IgG1/IgG2A/IgG2B/IgG3依克隆號(hào)而定)為主。如果你的另一支關(guān)鍵抗體也是小鼠來(lái)源,那么在同一張切片上直接做間接法雙標(biāo)就會(huì)產(chǎn)生二抗交叉識(shí)別。解決路徑包括:①將其中一個(gè)標(biāo)記改用直接偶聯(lián)一抗(F(ab')?-level conjugation)跳過(guò)二抗步驟;②采用TSA-酪胺信號(hào)放大系統(tǒng)的多輪染色方案(每輪結(jié)束后用強(qiáng)洗脫液去除一抗/二抗復(fù)合物但保留HRP沉積信號(hào));③將其中一者的IHC留作相鄰連續(xù)切片單獨(dú)染色比對(duì)。具體選哪條路,取決于你實(shí)驗(yàn)室已有的二抗體系和染色設(shè)備。
Q2:凍干粉收到后,用什么復(fù)溶液?復(fù)溶后能放多久?
A:具體復(fù)溶體積與推薦緩沖液組成務(wù)必以隨瓶說(shuō)明書為準(zhǔn)(常見做法是加入指定μL的超純水或含0.1%BSA的PBS)。復(fù)溶后強(qiáng)烈建議分裝(例如10~20 μL/管)存-20 °C,每次實(shí)驗(yàn)取一管融化使用;不要整管反復(fù)從-20取出→化凍→放回。工作中稀釋好的工作液一般4 °C可撐當(dāng)天或數(shù)天,但不建議長(zhǎng)期囤工作液。
Q3:我用Swant的Calbindin D-28k做石蠟IHC,怎么選抗原修復(fù)?
A:這是一個(gè)沒有"正確答案"的參數(shù)。兩條最常見的修復(fù)路線是檸檬酸鈉pH 6.0和EDTA pH 9.0(HIER,壓力鍋或水煮法)。很多用戶的經(jīng)驗(yàn)是:Calbindin D-28k在EDTA pH 9.0高壓修復(fù)下信號(hào)更亮,但也更依賴背景控制(封閉血清濃度、內(nèi)源性過(guò)氧化物酶清除、二抗來(lái)源純度)。建議第一次上新抗體時(shí),做一個(gè)2×2小矩陣:修復(fù)緩沖pH 6.0 vs 9.0 × 一抗稀釋1:2,000 vs 1:5,000,用同一塊陽(yáng)性組織(小腦是好的內(nèi)置陽(yáng)性對(duì)照——浦肯野細(xì)胞強(qiáng)陽(yáng)性、顆粒層弱/陰),一眼就能選出你的系統(tǒng)優(yōu)條件。
Q4:抗GABA抗體染色太淺 / 背景花,怎么辦?
A:抗遞質(zhì)抗體對(duì)固定的依賴是所有IHC里最"挑剔"的一類之一。如果你的固定只用4% PFA沒有戊二醛,遞質(zhì)分子可能在漂洗與后續(xù)步驟中流失,導(dǎo)致信號(hào)弱。改善方向:①改用0.1~0.5%戊二醛 + 4% PFA灌注固定(戊二醛味大且有自發(fā)熒光風(fēng)險(xiǎn),需要NaBH?后處理減熒);②提高封閉液BSA到2%并降低一抗稀釋度(寧濃勿稀的思路);③做吸附對(duì)照確認(rèn)信號(hào)是不是真的遞質(zhì)依賴;④考慮用GAD65/67(合成酶)免疫標(biāo)記作為GABA能表型的補(bǔ)充證據(jù),二者邏輯不同但互相支撐。
Q5:Parvalbumin染色在石蠟切片上總是"只有零星幾個(gè)細(xì)胞亮",是抗體不行嗎?
A:不一定。PV是小分子蛋白,對(duì)過(guò)度固定和過(guò)度修復(fù)都很敏感。排查順序建議是:①檢查原始固定方案(灌注固定是否及時(shí)、固定液是否新鮮、固定時(shí)長(zhǎng)是4 h還是過(guò)夜以上);②換修復(fù)條件做對(duì)比(檸檬酸鹽pH 6.0 vs EDTA pH 9.0,壓力鍋時(shí)間從短到長(zhǎng)梯度試);③確認(rèn)陽(yáng)性對(duì)照組織——小腦的浦肯野細(xì)胞通常不表達(dá)PV(注意這與Calbindin D-28k不同),但小腦白質(zhì)中的籃狀/星形細(xì)胞及某些腦干運(yùn)動(dòng)核周圍有PV陽(yáng)性信號(hào),可用作內(nèi)部參照;④如果仍只有個(gè)別細(xì)胞亮,考慮是否存在組織預(yù)處理溫度過(guò)高(如烤片>65 °C太久)導(dǎo)致小蛋白表位降解,可嘗試降低烤片溫度/縮短時(shí)間。
Q6:我做Western Blot,PMCA抗體出現(xiàn)了好幾條帶,怎么判斷哪個(gè)是對(duì)的呢?
A:PMCA有多個(gè)基因(PMCA1~4)、可變剪接異構(gòu)體、以及不同程度的糖基化修飾,因此在不同組織中的條帶圖譜不全一致。判讀原則:①看說(shuō)明書提供的預(yù)期表觀分子量范圍(通常在120~140 kDa附近,但糖基化可讓部分條帶上移);②一定跑陽(yáng)性對(duì)照(推薦用Swant自家的重組PMCA片段蛋白或已知高表達(dá)組織裂解物);③必要時(shí)用重組抗原做吸附對(duì)照——能被吸附走的條帶更可能是真實(shí)結(jié)合,不能被吸附的非特異帶則需要靠更嚴(yán)格的封閉條件(0.05% NaN??不,NaN?會(huì)殺HRP——改為提高鹽濃度如300 mM NaCl + 0.1% Tween-20)來(lái)壓制。
Q7:Swant的抗體能不能用于流式細(xì)胞術(shù)(表面染色)?
A:Swant的主力抗體多為針對(duì)胞內(nèi)/胞質(zhì)抗原(鈣結(jié)合蛋白、遞質(zhì)、鈣泵胞內(nèi)域等),因此在完整活細(xì)胞表面染色場(chǎng)景下通常不適用。如果想用于胞內(nèi)流式(intracellular flow),需要做固定+透化預(yù)處理,且事先要驗(yàn)證該克隆在透化條件下的結(jié)合行為與信噪比——這不是默認(rèn)保證的用途,建議先小量試用以確認(rèn)可行性再批量采購(gòu)。
Q8:如果我想確認(rèn)某支Swant抗體對(duì)應(yīng)的RRID或文獻(xiàn)引用,去哪里查?
A:可以在CiteAb、Antibody Registry以及PubMed中用靶標(biāo)名稱(如"Calbindin D-28k Swant" / "Parvalbumin PV235 Swant"等)做組合檢索;Swant(swant.com)也會(huì)列出部分產(chǎn)品引用的代表性文獻(xiàn)方向供參考。采購(gòu)時(shí)你也可以向供貨方索要該批次對(duì)應(yīng)的已有驗(yàn)證數(shù)據(jù)摘要。
Q9:訂購(gòu)與售后技術(shù)支持由誰(shuí)負(fù)責(zé)?
A:在中國(guó)區(qū),Swant品牌相關(guān)產(chǎn)品的咨詢、報(bào)價(jià)與供應(yīng)服務(wù),由上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司作為特約代理經(jīng)銷商提供服務(wù)支持,包括產(chǎn)品選型溝通、批次信息確認(rèn)、到貨冷鏈物流跟蹤以及售后問題的對(duì)接反饋。
Q10:Swant的產(chǎn)品能否用于臨床體外診斷或人體治療?
A:不能。Swant的抗體與抗原產(chǎn)品均標(biāo)注為僅供科研使用(for research use only),不用于臨床診斷、治療或直接施用于人體。
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貨號(hào) | 品名 | 規(guī)格 |
235-200ul | Monoclonal anti parvalbumin | 200ul |
pv27-200ul | Parvalbumin | 200ul |
CB38-200ul | Rabbit anti-Calbindin D-28k | 200ul |
300-200ul | Monoclonal anti Calbindin D-28k | 200ul |
6B3-200ul | Calretinin | 200ul |
7697-200ul | Rabbit Antiserum lyophil | 200ul |
PVG-213 | Goat anti-parvalbumin | 200ul |
PV27-200uL | Rabbit anti-parvalbumin | 200uL |
OMG4 | Rabbitantiserum to Oncomodulin | 200ul |
PV235 | Monoclonal anti parvalbumin | 200ul |
CRgp7 | Guinea pig antiserum against calretinin | 100ul |
PV27a-200ul | Rabbit anti-Parvalbumin Antibody | 200uL |
p11-13 | Rabbit Na+ -Ca2+ exchanger | 200ul |
2D7 | Glutamate | 200ul |
PVG213 | Goat anti-Parvalbumin Antibody | 200 ul |
PV-235 | Parvalbumin | ea |
PV235-200ul | Monoclonal anti-Parvalbumin Antibody | 200ul |
PV235PUR | Purified Monoclonal anti-Parvalbumin Antibody | 100ul |
OMG4 | Rabbit anti-Oncomodulin Antibody | 200uL |
GP72 | Guinea pig antiserum against parvalbumin | 100ul |
CR7697-200uL | Rabbit anti-Calretinin Antibody | 200uL |
CR6B3-200uL | CR6B3 - Calretinin | 200uL |
CG1 | Calretinin | 200ul |
CB38a-200uL | CB38a - Calbindin-200uL | 200uL |
CB300PUR | Affinity purified mouse monoclonal anti Calbindin D-28k | 100uL |
CB300-500ul | CB300 - Calbindin-500uL | 500ul |
CB300-200uL | CB300 - Calbindin-200uL | 200uL |
95209 | Rabbit Na+ -Ca2+ exchanger (NCX3) | 200ul |
235REC | Rabbit monoclonal recombinant anti-Parvalbumin Antibody | 100uL |
300-500ul | Monoclonal anti Calbindin D-28k | 500ul |
3A12-200uL | Monoclonal anti-GABA Antibody | 200uL |
300REC | Rabbit monoclonal recombinant anti Calbindin Antibody | 100uL |
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