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invivogen LyoVec說(shuō)明書

更新時(shí)間：2021-04-23 點(diǎn)擊次數(shù)：3163

invivogen提供了廣泛的試劑，工程細(xì)胞系和測(cè)定試劑盒，可滿足您對(duì)先天免疫和哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)的研究需求。

對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)，我們提供微生物污染的解決方案，以及選擇性抗生素和內(nèi)毒素檢測(cè)試劑盒。

我們還提供了一個(gè)擴(kuò)展的報(bào)告細(xì)胞系集合，以監(jiān)測(cè)由細(xì)胞因子或模式識(shí)別受體（PRR）配體誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)途徑。

對(duì)于主要的PRR信號(hào)通路，我們提供相關(guān)配體，抑制劑和抗體的家族。

此外，我們提供了多種人類和鼠類基因，細(xì)胞啟動(dòng)子以及用于不同應(yīng)用的克隆和表達(dá)載體的選擇。

細(xì)胞轉(zhuǎn)染

表達(dá)GFP的質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染

用表達(dá)GFP的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染THP-1細(xì)胞

細(xì)胞轉(zhuǎn)染包括將“外源”核酸（例如質(zhì)粒或siRNA）引入細(xì)胞中，以分別過(guò)表達(dá)或沉默目的基因。轉(zhuǎn)染可以在各種細(xì)胞環(huán)境中對(duì)特定基因的表達(dá)進(jìn)行功能評(píng)估。根據(jù)核酸的類型以及細(xì)胞的類型，可以使用許多不同的轉(zhuǎn)染方案。轉(zhuǎn)染的三種主要方法是化學(xué)的（例如陽(yáng)離子脂質(zhì)），物理的（例如電穿孔）和生物的（例如病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)）。新引入的核酸可以是瞬時(shí)存在的，從而該基因僅在有限的時(shí)間段內(nèi)表達(dá)而不能復(fù)制，也可以穩(wěn)定地存在，由此該基因整合到受體細(xì)胞的基因組中。細(xì)胞轉(zhuǎn)染后

仍難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞（例如免疫細(xì)胞）通常會(huì)表達(dá)能檢測(cè)外源核酸的強(qiáng)效胞質(zhì)傳感器。因此，需要轉(zhuǎn)染增強(qiáng)劑或加強(qiáng)劑來(lái)禁用這些防御，從而有助于促進(jìn)核酸表達(dá)并大大提高轉(zhuǎn)染成功率。

InvivoGen提供：

LyoVec™：一種專有的基于陽(yáng)離子脂質(zhì)的轉(zhuǎn)染試劑，屬于磷脂家族。它很容易用于許多細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染，例如人類胚胎腎-293（HEK-293）細(xì)胞系。
NATE™：一種核酸轉(zhuǎn)染增強(qiáng)劑，可提高瞬時(shí)和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染效率。它被設(shè)計(jì)與轉(zhuǎn)染試劑和推薦用于難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞（例如人單核細(xì)胞和鼠巨噬細(xì)胞（分別為THP-1和RAW 264.7））一起使用的技術(shù)結(jié)合使用。
選擇性抗生素：范圍廣泛的高純度和無(wú)內(nèi)毒素的選擇性抗生素，包括彈性蛋白，Zeocin™，嘌呤霉素，G418，潮霉素B金和菌霉素。它們可用于在哺乳動(dòng)物和細(xì)菌細(xì)胞中進(jìn)行選擇。

invivogen LyoVec說(shuō)明書

LyoVec™	單位大小	貨號(hào)
用于轉(zhuǎn)染哺乳動(dòng)物細(xì)胞的陽(yáng)離子脂質(zhì)+ 1小瓶的對(duì)照LyoVec™-GFP / SEAP復(fù)合物	8ml，160次反應(yīng) 10毫升，200次反應(yīng) 18毫升，360次反應(yīng) 20 ml，400次反應(yīng) 16毫升，320反應(yīng)	LYEC-12 lyec-1 LYEC-22 lyec-2 lyec-3

凍干脂質(zhì)基轉(zhuǎn)染試劑

LyoVec™是一種專有的基于陽(yáng)離子脂質(zhì)的轉(zhuǎn)染試劑，屬于磷脂家族。該家族最初被Floch等人描述為在體外和體內(nèi)使用的有效轉(zhuǎn)染試劑[1-2]。

LyoVec™的主要成分是磷脂DTCPTA，它與DiPPE偶聯(lián)，DiPPE是一種中性脂質(zhì)，有助于使膜雙層穩(wěn)定并提高LyoVec™的體外轉(zhuǎn)染效率。

如何使用LyoVec™

LyoVec ™的應(yīng)用：

陽(yáng)離子脂質(zhì)基轉(zhuǎn)染試劑
核酸絡(luò)合劑

磷脂的正電荷可使LyoVec™與質(zhì)粒DNA結(jié)合，并且該結(jié)構(gòu)可促進(jìn)與細(xì)胞膜的融合，從而實(shí)現(xiàn)有效的DNA傳遞。

另外，LyoVec™可用作核酸絡(luò)合劑，以促進(jìn)細(xì)胞進(jìn)入RNA或基于DNA的寡核苷酸，例如RIG-1配體（例如poly（dA：dT）[3]和poly（I：C） [4]）和內(nèi)體TLR7 / 8配體（例如ssPolyU [5]）。該復(fù)合步驟對(duì)于通過(guò)病原體識(shí)別受體誘導(dǎo)對(duì)核酸的有效應(yīng)答是至關(guān)重要的。

參考

1. Floch等人， 1997。陽(yáng)離子磷脂作為非病毒載體，可在造血細(xì)胞系和CD34 +細(xì)胞中進(jìn)行DNA轉(zhuǎn)染。血細(xì)胞分子與疾病23：69-87。
2. Guillaume-Gable等， 1998。陽(yáng)離子磷脂作為小鼠肺中非病毒基因轉(zhuǎn)移劑。嗡嗡聲基因The 9：2309-2319。
3. Xie M.等人， 2016。依賴PKM2的糖酵解促進(jìn)NLRP3和AIM2炎性體激活。Nat Commun。7：13280。
4.JärverP.等人， 2018。單鏈核酸通過(guò)干擾網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的胞吞作用來(lái)調(diào)節(jié)TLR3 / 4/7活化。科學(xué)8：15841。
5.片芝等人， 2011年。人髓樣樹突狀細(xì)胞中的雙鏈DNA和單鏈RNA分別誘導(dǎo)了干擾素-α和白介素12。免疫學(xué)。132（2）：165-73。

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規(guī)格

動(dòng)手時(shí)間：不超過(guò)15分鐘，轉(zhuǎn)染前一天無(wú)需任何準(zhǔn)備

轉(zhuǎn)染：瞬時(shí)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染

條件：在有血清的情況下工作，轉(zhuǎn)染后無(wú)需洗滌細(xì)胞

保質(zhì)期：質(zhì)粒DNA（pDNA）/ LyoVec™復(fù)合物的保質(zhì)期長(zhǎng)

質(zhì)量控制：

LyoVec™的轉(zhuǎn)染效率已在HEK293衍生的細(xì)胞中得到證實(shí)。
已經(jīng)評(píng)估了HEK293衍生細(xì)胞的細(xì)胞毒性。

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內(nèi)容

LyoVec™以凍干粉的形式提供，無(wú)菌并包裝在密封的玻璃小瓶中。

該產(chǎn)品有不同的格式：

lyec-1：5個(gè)小瓶（足以在12孔板中進(jìn)行200個(gè)反應(yīng)）
lyec-2：10個(gè)小瓶（足以在12孔板中進(jìn)行400個(gè)反應(yīng)）
lyec-3 ：2個(gè)大瓶（足以在12孔板中進(jìn)行320個(gè)反應(yīng)）
lyec-12：4個(gè)小瓶（足以在12孔板中進(jìn)行160個(gè)反應(yīng)）和1個(gè)對(duì)照LyoVec™-GFP / SEAP復(fù)合物。
lyec-22：9個(gè)小瓶（足以在12孔板中進(jìn)行360個(gè)反應(yīng)）和1個(gè)對(duì)照LyoVec™-GFP / SEAP復(fù)合物。

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