Fina Biosolutions, LLC公司由Andrew Lees博士創(chuàng)立于2006年，起初公司致力于幫助疫苗制造商生產(chǎn)結(jié)合疫苗。隨后FinaBio公司提供各種生物結(jié)合和蛋白制備服務(wù)。Fina Biosolutions公司分子生物學(xué)檢測(cè)團(tuán)隊(duì)研發(fā)出了用于生產(chǎn)載體蛋白的大腸桿菌菌株，用于載體蛋白的生產(chǎn)，CRM197 and rTTHc蛋白已用于臨床前研究。此外，Fina Biosolutions專注于多糖標(biāo)記的功能化葡聚糖和相關(guān)產(chǎn)品的生產(chǎn)，產(chǎn)品包括：氨基和羧基右旋糖酐，熒光右旋糖酐單功能和多功能右旋糖酐等。

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特色產(chǎn)品：CRM197 載體蛋白
CRM 優(yōu)于KLH 作為載體蛋白 ，使用 Fina Biosolutions 的 CRM，EcoCRM 改善免疫應(yīng)答和療效。鑰孔血藍(lán)蛋白 (Keyhole limpet hemocyanin，KLH) 因其*的免疫原性和易于獲得而常被用作載體蛋白。然而，由于其多絲起源和較差的表征，天然 KLH 不是理想的載體。相比之下，遺傳解毒的白喉毒素 CRM 是 58.4 kDa 的重組蛋白，也具有高度免疫原性。通過 MALDI-TOF 質(zhì)譜可以很容易地表征藥物和肽 CRM 偶聯(lián)物。我們的研究表明，用 Fina Biosolutions 的 CRM，EcoCRM 制成的結(jié)合物的免疫原性等于或優(yōu)于 KLH 的結(jié)合物。197 作為一種外源蛋白，KLH 誘導(dǎo)自身和與其連接的分子產(chǎn)生*的抗體滴度。
然而，KLH 是從海蝸牛的血液中獲得的，使得規(guī)模擴(kuò)大和臨床使用具有挑戰(zhàn)性。它是一種混亂的、有點(diǎn)不明確的聚合蛋白，這使得很難對(duì)其進(jìn)行表征。此外，KLH 在低鹽和中性 pH 溶液中的溶解度較差，KLH 結(jié)合物的質(zhì)量控制存在問題。目前尚無使用 KLH 作為載體蛋白的許可疫苗。相反，CRM 是一種基因解毒的白喉毒素，在細(xì)菌中重組產(chǎn)生，為 58.4 kDa 的定義明確的蛋白。CRM 用于多種許可疫苗，包括 Prevnar。Fina Biosolutions 開發(fā)了一種*的大腸桿菌菌株，其以高產(chǎn)率將 CRM 表達(dá)為一種可溶性、適當(dāng)折疊的細(xì)胞內(nèi)蛋白。該蛋白以大腸桿菌 CRM 的商品名“EcoCRM”上市。EcoCRM 可用于研究和臨床。我們一致發(fā)現(xiàn) EcoCRM 偶聯(lián)物誘導(dǎo)的抗體應(yīng)答等于或大于 KLH 偶聯(lián)物。此外，與 KLH 不同，CRM 結(jié)合物可通過 SDS PAGE 和質(zhì)譜進(jìn)行表征。®197 我們的研究表明，用 EcoCRM（Fina Bio 的 CRM）制備的結(jié)合物的免疫原性與用 KLH 制備的結(jié)合物相當(dāng)。

A. MALDI-TOF 法表征載體蛋白和結(jié)合物。與半抗原偶聯(lián)前 (A1) 和偶聯(lián)后 (A2) 分析 EcoCRM® 載體蛋白。使用在高質(zhì)量線性模式下操作的 Applied Biosystems/MDS SCIEX 54800 MALDI TOF/TOF 分析儀分析樣品。
B. 抗體半抗原 IgG 反應(yīng)。在第 0、14 和 28 天，用 1 mg 明礬佐劑配制的 100µg 未結(jié)合 KLH（對(duì)照）、Hapten-KLH 或 Hapten-EcoCRM s.c. 免疫 BALB/c 小鼠（n≥4 只/組）。ELISA 法測(cè)定抗半抗原滴度。

肽 PepL1 與 FinaBio 的即用型結(jié)合物 CRM-馬來酰亞胺或 KLH（由肽合成公司）結(jié)合。即用型結(jié)合物 CRM-馬來酰亞胺促進(jìn)了 EcoCRM 結(jié)合物的合成。如圖所示，與 KLH 結(jié)合物相比，CRM 結(jié)合物產(chǎn)生了*的抗肽抗體應(yīng)答。小鼠在接種疫苗后產(chǎn)生免疫反應(yīng)，并用靶向伯克霍爾德菌表面 OMP 的肽-蛋白 +/-佐劑增強(qiáng)免疫反應(yīng)。AddaVax 佐劑 (~MF59)。FinaBio 的 Ready-to-conjugate CRM 對(duì)結(jié)合物的響應(yīng)顯著高于 KLH。還應(yīng)注意，即使不存在佐劑，CRM 結(jié)合物也具有免疫原性。
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