bmgrp BI-20032說明書

oLAB (Anti-Oxidized LDL Autoantibodies) ELISA | BI-20032

 oLAB（抗氧化的LDL自身抗體）ELISA | BI-20032

 抗氧化的LDL自身抗體ELISA（oLAB）亮點(diǎn)：

• 樣本量小
• 總孵育時(shí)間僅2小時(shí)15分鐘
• 包含2個(gè)控件
• CE標(biāo)記–在歐盟用于IVD

分析特征

• 方法

  間接ELISA，HRP / TMB，12×8孔可分離試紙

• 樣品類型

  血清

• 樣品量

  50微升/孔

• 測定時(shí)間

  1.5小時(shí)/ 30分鐘/ 15分鐘

• 靈敏度

  48毫升/毫升

• 標(biāo)準(zhǔn)范圍

  0 – 1,200 mU / ml

• 特異性

  抗氧化的LDL自身抗體

•  

  中間運(yùn)行（n = 5）：≤8％CV

  批量分析（n = 8）：≤4％CV

• 采用

  CE標(biāo)記–在歐盟用于IVD

產(chǎn)品詳情

抗氧化的LDL自身抗體產(chǎn)品概述

抗氧化LDL自身抗體（oLAB）免疫分析是2小時(shí)15分鐘的96孔間接ELISA，用于定量測定血清中的抗氧化LDL自身抗體。

抗氧化的LDL自身抗體的測定原理

抗oxldl抗體ELISA試劑盒是一種間接酶免疫法，用于定量測定血清樣品中的抗氧化LDL自身抗體。

一步，將預(yù)先稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品/對照品/樣品移入微量滴定條的孔中，并預(yù)先用氧化的LDL抗原包被。標(biāo)準(zhǔn)品/對照/樣品中存在的抗氧化LDL自身抗體與孔中預(yù)包被的抗原結(jié)合。在去除所有非特異性未結(jié)合物質(zhì)的洗滌步驟之后，將綴合物（單克隆抗人IgG-HRP）移入孔中，并與抗氧化的LDL自身抗體發(fā)生反應(yīng)。
在另一個(gè)洗滌步驟之后，將底物（TMB，四甲基聯(lián)苯胺）吸移到孔中。底物的酶催化顏色變化與樣品中存在的抗氧化LDL自身抗體的數(shù)量成正比。使用標(biāo)準(zhǔn)酶標(biāo)儀可以檢測到這種顏色變化。直接從劑量響應(yīng)曲線確定樣品中抗氧化的LDL自身抗體的濃度。

抗氧化的LDL自身抗體典型標(biāo)準(zhǔn)曲線

下圖顯示了oxldl分析試劑盒的典型標(biāo)準(zhǔn)曲線。 

抗氧化的LDL自身抗體ELISA試劑盒組件     

儲存說明： oLAB ELISA試劑盒中的所有試劑在4°C（2-8°C）的溫度下均穩(wěn)定，直到每種試劑標(biāo)簽上標(biāo)明的有效期為止。

樣品收集與儲存

血清適合用于此oxldl分析試劑盒。我們建議對所有樣品，標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品進(jìn)行重復(fù)測量。列出的樣品收集和儲存條件旨在作為一般準(zhǔn)則。

血清

在標(biāo)準(zhǔn)化的血清分離管（SST）中收集靜脈血樣。讓樣品在室溫下凝結(jié)30分鐘。根據(jù)試管制造商的使用說明離心分離。立即測定采集的樣品，或等分試樣并保存在-25°C或更低的溫度下。脂血或溶血的樣品可能會產(chǎn)生錯(cuò)誤的結(jié)果。樣品解凍不要超過四次。

試劑準(zhǔn)備

洗滌緩沖液

稀釋的WASHBUF在4°C（2-8°C）下可以穩(wěn)定長達(dá)一個(gè)月。 

樣品制備

將樣品置于室溫并輕輕混合樣品，以確保樣品均勻。我們建議對所有樣品進(jìn)行重復(fù)測量。

抗氧化的LDL自身抗體測定方案

在開始測定之前，請閱讀整個(gè)方案。

在預(yù)稀釋板中

注意：所有STD / CTRL / SAMPLE（標(biāo)準(zhǔn)品/對照品/樣品）都必須以1:55的終稀釋度使用（預(yù)稀釋度1：5 +稀釋度1:11）。將隨附的DILPLATE（未涂布的微量滴定板）用于1：5的預(yù)稀釋步驟。

注意：預(yù)稀釋的物質(zhì)必須在15分鐘內(nèi)用于測定。

在預(yù)涂板中

計(jì)算結(jié)果

從所有其他值中減去為空白獲得的吸光度讀數(shù)。使用能夠生成四參數(shù)對數(shù)（4-PL）擬合的可商購軟件從標(biāo)準(zhǔn)值構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。或者，將標(biāo)樣在x軸上的濃度相對于每種標(biāo)樣在y軸上的平均吸光度作圖，并通過圖中的點(diǎn)繪制佳擬合曲線。除4-PL以外的曲線擬合算法尚未得到驗(yàn)證，用戶需要對其進(jìn)行評估。

從標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品濃度。光密度（OD）值超過標(biāo)準(zhǔn)范圍高點(diǎn)的樣品可以進(jìn)一步稀釋。計(jì)算樣品的終濃度時(shí)，必須考慮使用1：5以外的樣品稀釋液。

套件隨附的質(zhì)量控制協(xié)議顯示了每個(gè)套件終版本QC的結(jié)果。客戶獲得的光密度數(shù)據(jù)可能會受到各種影響，包括在整個(gè)保質(zhì)期內(nèi)正常降低信號強(qiáng)度。但是，只要濃度高的標(biāo)準(zhǔn)品的光密度為1.00或更高，并且CTRL的值在目標(biāo)范圍內(nèi)（參見標(biāo)簽），這就不會影響結(jié)果的有效性

抗氧化的LDL自身抗體

氧化的低密度脂蛋白（oxLDL）被認(rèn)為在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展中起關(guān)鍵作用。oxLDL在巨噬細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞中的積累會導(dǎo)致泡沫細(xì)胞形成，這是疾病的一步。可以將抗氧化修飾的LDL的自身抗體用作能始終反映體內(nèi)發(fā)生的氧化過程的參數(shù)。實(shí)際上，已經(jīng)在患有冠狀動(dòng)脈疾病的患者的血流中檢測到針對oxLDL的自身抗體水平升高。此外，近的研究表明，針對oxLDL的自身抗體與頸動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展之間存在相關(guān)性。在諸如先兆子癇和系統(tǒng)性紅斑狼瘡等各種疾病中，oLAB的血清濃度也有所增加。
oLAB的臨床應(yīng)用概述已經(jīng)發(fā)布。

• 心血管疾病

  • 動(dòng)脈粥樣硬化（Bornaun等人，2017; de Freitas等人，2018; Pawlak等人，2012; Shoji等人，2003; Stanek等人，2018）
  • 冠狀動(dòng)脈疾病（Faviou等，2005; Miller等，2003）
  • 心肌梗塞（Huang et al。，2013）
  • 中風(fēng)（Ciancarelli et al。，2012）

• 其他

  • 急性敗血癥（Al-Banna和Lehmann，2013年）
  • 先兆子癇（Arifin et al。，2017）